EXTRACCIÓN DE ADN
PRÁCTICA 12: EXTRACCIÓN DE ADN
OBJETIVO:
El ADN se extrae porque sus cargas negativas atraen los iones salinos, los disuelven y permiten la extracción de la célula.
Vamos a extraer ADN de una hoja de lechuga y un plátano timando sus trozos con un poco de agua. Así, conseguiremos un caldo molecular que, al mezclarlo con una disolución tampón con detergente, el ADN se disolverá. Y con alcohol isoamílico extraeremos posteriormente el ADN, ya que funciona como reactivo.
MATERIALES:
- Materiales de laboratorio:
- Nevera
- Tubos de ensayo
- Vaso de precipitados
- Papel secante
- Pipetas
- Mortero
- Varilla
- Gradilla
- Colador
- Reactivos:
- Alcohol isoamílico
- 5 ml de detergente
- 1,5 g de sal de mesa
- 5 g de bicarbonato sódico
- Granos de arena
- Materiales biológicos:
- Hoja de lechuga
- Plátano
- 120ml de agua destilada
METODOLOGÍA:
Primero, preparamos la disolución tampón mezclando 120ml de agua destilada,
1,5 g de sal de mesa, 5 g de bicarbonato sódico y 5 ml de detergente. Después, lo metemos en la nevera.
A continuación, partimos la hoja de lechuga, la echamos al mortero y, con un poco de agua, trituramos y removemos hasta obtener una especie de caldo. Nos ayudaremos con unos granos de arena para que se rompan las células.
Con un colador retiramos los restos sólidos de arena y lechuga y dejamos el líquido en un vaso.
Echamos 5 ml de la mezcla en un tubo de ensayo con una pipeta, y 10 ml del tampón con otra pipeta. Agitamos la mezcla durante unos minutos.
Ahora, en otro tubo de ensayo vertemos 5 ml de la mezcla y añadimos 10 ml del alcohol isoamílico. El alcohol quedará flotando sobre la mezcla.
Removemos hacia delante y hacia atrás con la varilla para hacer subir el ADN y observamos los resultados. Realizamos exactamente el mismo proceso con el plátano cortado e trozos.
RESULTADOS:
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